<h1><b><font color="#ed2308"><br></font></b></h1><h1><b><font color="#ed2308">今天是“中國醫(yī)師節(jié)”，首先祝廣大微生物同行們節(jié)日快樂，工作順利！</font></b></h1><h3></h3><h3><br></h3> <h1><b><font color="#167efb">最近微生物大講堂的老師們都聽過魯炳懷老師、時(shí)東彥老師等諾卡菌的相關(guān)課程，廣大微生物同行們對(duì)諾卡菌的認(rèn)識(shí)有了新的理解和提高。今天東科老師從形態(tài)學(xué)入手，手把手教學(xué)如何制作漂亮的諾卡菌永久示教片。</font></b></h1><h1><br></h1><h1>咱們先來看幾張圖片</h1><h3></h3> <h1><b>能想象到圖一、二和圖三都是諾卡菌的染色形態(tài)嗎？不同的方法造就了它的差異，想必很少有人見過諾卡菌的原生態(tài)生長(zhǎng)狀況吧，東科老師將帶你走進(jìn)諾卡菌的微觀世界。<br></b><b>要想知道原由得先來復(fù)習(xí)下諾卡菌的相關(guān)知識(shí)</b></h1> <h3>諾卡菌屬（Nocardia）隸屬于細(xì)菌域，放線菌門，放線菌綱，棒桿菌目，諾卡菌科(Nocardiaceae)。</h3> <h3>諾卡菌在自然界分布廣泛，多為腐生寄生菌，與人類疾病關(guān)系最大的是星形諾卡菌和巴西諾卡菌，多為外源性感染。星形諾卡菌是一種機(jī)會(huì)致病菌，主要通過呼吸道入侵肺部，引起化膿性炎癥與壞死，癥狀類似結(jié)核病，病灶可向其他組織器官擴(kuò)散，進(jìn)而引起腦膜炎、腹膜炎等。星形諾卡菌肺炎患者的痰標(biāo)本呈肺結(jié)核樣的干酪痰。巴西諾卡菌可通過損傷的皮膚侵犯皮下組織，產(chǎn)生慢性化膿性肉芽腫，表現(xiàn)為膿腫及多發(fā)性瘺管，好發(fā)于足和腿部，稱為足菌腫（mycetoma）。此外，巴西諾卡菌還可引起蜂窩織炎，皮膚膿腫及皮膚淋巴感染。</h3> <h3>諾卡菌為嚴(yán)格需氧菌。在沙保羅瓊脂或普通瓊脂培養(yǎng)基上，室溫或35℃均可緩慢生長(zhǎng)，初代分離常需孵育1周。諾卡菌種與種之間菌落形態(tài)存在差異，同一種的不同分離株在不同培養(yǎng)基上或不同的培養(yǎng)時(shí)間菌落形態(tài)差異很大?？沙霈F(xiàn)光滑到顆粒狀、不規(guī)則、表面皺褶或堆集的菌落。幾乎都能形成氣生菌絲，使菌落表面出現(xiàn)粉狀或天鵝絨樣氣生菌絲體，菌落有泥土氣味。為避免粉狀氣生菌絲的干擾，在半透明培養(yǎng)基（如沙保羅瓊脂）上生長(zhǎng)的菌落最好在培養(yǎng)基反面觀察菌落顏色。<b></b></h3> <h1><b>諾卡菌屬中與人體感染有關(guān)菌種約20個(gè)種，種間形態(tài)上有些差異不大或有些差異很明顯。菌落直接涂片，看不清結(jié)構(gòu)，斷裂后形態(tài)都一樣。只有小培養(yǎng)才能體現(xiàn)諾卡菌的原生態(tài)，利用絲狀真菌的瓊脂塊培養(yǎng)法就能模擬諾卡菌90°分枝的原生態(tài)生長(zhǎng)狀態(tài)。</b></h1><h3><b><br></b></h3><h1>先將諾卡菌的小培養(yǎng)制作好</h1> <h3>培養(yǎng)一周的諾卡菌菌落</h3> <h3>開始制作示教片，需要準(zhǔn)備的材料有:已小培養(yǎng)好的諾卡菌、封片膠、一次性吸管、載玻片、蓋玻片、鑷子、酒精燈。</h3> <h3>在載玻片上加一滴封片膠</h3> <h3>將培養(yǎng)好的蓋玻片(陳老師用的18x18mm)輕輕揭起，背面稍微過火固定下，再把蓋玻片背面輕放在封片膠上</h3> <h3>待其固定在載玻片上，一般一天左右可干透</h3> <h3>東科老師的批量制作</h3> <h3>將干透后的玻片進(jìn)行不同的染色，按正常染色程序進(jìn)行即可</h3> <h3>待染好色的玻片干后再進(jìn)行封片。將封片膠滴加在染好色的菌落最中間</h3> <h3>夾起一塊稍大的玻片蓋在封片膠上(陳老師使用的20x20mm),動(dòng)作要輕柔不要弄出氣泡，這樣示教片保存的時(shí)間更長(zhǎng)久</h3> <h3>將封片的玻片放在平整的地方干透，非常漂亮又原生態(tài)的諾卡菌示教片就制作好了</h3> <h3>東科老師不同染色方法批量制作的示教片</h3> <h1><font color="#010101"><b><br></b></font></h1><h1><font color="#010101"><b>學(xué)會(huì)了嗎？是不是很簡(jiǎn)單呢？如果有疑惑也別擔(dān)心，陳老師拍了視頻來手把手教學(xué)，趕緊看起來</b></font></h1><h3><font color="#010101"><b><br></b></font></h3> <h3>染色好后再封片</h3> <h1>再學(xué)不會(huì)陳老師就要打手板心了喲，趕緊動(dòng)手做起來吧。<b>要想知道諾卡菌各種之間的形態(tài)學(xué)差異，請(qǐng)關(guān)注東科老師的《實(shí)用臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)與圖譜》第二版，小小地透露下已經(jīng)在做最后的收尾工作啦??????</b></h1><h3></h3> <h1><b><font color="#ff8a00"><br></font></b></h1><h1><b><font color="#ff8a00">福利——東科老師制作的諾卡菌示教片欣賞</font></b></h1><h3></h3> <h3>未染色</h3> <h3>革蘭染色</h3> <h3>弱抗酸染色</h3> <h3>加一例鏈霉菌</h3>