<p class="ql-block"><b>黑樹莓與癌癥的關系</b></p><p class="ql-block">研究發(fā)現(xiàn)，黑樹莓可調節(jié)機體免疫功能，這與慢性炎癥及相關體外腫瘤進展都有一定的關系。此外，各成熟階段的水果可通過減少一氧化氮（NO）和前列腺素E2（PGE2）的產生來減少促炎癥過程。</p><p class="ql-block">黑樹莓乙醇提取物可抑制人類CD4+和CD8+ T淋巴細胞的增殖和活力。它也可以調節(jié)促炎細胞因子IL-6和IL-2介導的轉錄因子STAT3和STAT5的磷酸化和轉錄激活。有趣的是，它們還會限制MDSC（髓源性抑制細胞）的擴增，抑制T淋巴細胞的激活。雖然這似乎與抑制T淋巴細胞的作用相反，但對抑制腫瘤作用也可以起到有益的作用，如在腫瘤微環(huán)境中，MDSCs可直接通過分泌促進腫瘤生長的因子來促進血管生成及淋巴管生成。黑樹莓提取物不但可以通過抑制MDSCs導致的腫瘤血管生成，還被發(fā)現(xiàn)可以通過其他抗血管生成的機制來抑制血管生成，即從源頭上抑制血管生成以及抑制血管原的血管生長，血管生長是通過基于組織的體外纖維蛋白凝膠進行測定的。</p><p class="ql-block"><b>上皮癌</b></p><p class="ql-block">致癌物BPDE（苯并[α]芘-7,8-二醇-9,10-環(huán)氧化物）可引起小鼠上皮CI41細胞系增殖，而相關的報道表明，黑樹莓可抑制癌細胞的增殖。</p><p class="ql-block">研究表明，黑樹莓提取物具有化學預防作用，能夠抑制BPDE誘導激活轉錄因子AP-1、NFκB、NFAT（活化T細胞的核因子）以及抑制相關基因如VEGF（血管內皮生長因子）、COX-2（環(huán)氧合酶2）和TNF-α（腫瘤壞死因子）的表達。已有許多種相關的假設機制來解釋上述黑樹莓的化學預防作用。一種是通過阻止MAPKs（絲裂原活化蛋白激酶）和IκBa（NFκB的抑制蛋白，一般以失活狀態(tài)存在于細胞質中）的磷酸化及抑制AP-1和NFκB的活化受損，從而?下調VEGF和COX-2。其他數(shù)據(jù)表明PI-3K/Akt信號轉導通路的抑制，可能與抑制AP-1和NFκB的活化受損有關。這些結果意味著黑樹莓成分具有靶向作用于不同信號轉導通路的潛力，從而發(fā)揮對上皮癌的化學預防作用。在后續(xù)研究中，發(fā)現(xiàn)抑制由BPDE誘導的NFκB活化作用的主要成分是矢車菊素-3-O-葡糖苷、-3-O-蕓香糖苷和-3-O-木糖基蕓香糖苷。</p><p class="ql-block">在一項SKH-1無毛小鼠的體內研究中，局部使用黑樹莓提取物可顯著減少皮膚炎癥及其癌變。在短期模型中，將小鼠暴露于一定劑量的UV-B輻射下，小鼠出現(xiàn)了小范圍的紅斑，局部分別用黑樹莓提取物或賦形劑處理。處理48小時后，用500μg黑樹莓提取物處理的小鼠的炎癥反應顯著減少，包括皮膚水腫、中性粒細胞活化、p53的蛋白質表達水平和DNA損傷標志物都顯著減少。在長期模型中，將小鼠暴露于相同劑量輻射，每周三次，持續(xù)25周，同時局部用黑樹莓提取物及賦形劑處理，發(fā)現(xiàn)與用賦形劑處理的小鼠（每只小鼠平均有30個腫瘤，腫瘤的平均大小為30.2 mm2）相比，用黑樹莓提取物處理的小鼠的腫瘤數(shù)及腫瘤大?。恐恍∈笃骄?7個腫瘤，腫瘤的平均大小為10.1 mm2）均有減少。這與腫瘤組織浸潤的CD4+和CD3+ foxp3+T細胞的水平顯著降低有關，而腫瘤組織浸潤的CD4+和CD3+ foxp3+T細胞的水平會促進UV-B誘導的炎癥反應和腫瘤發(fā)展。</p><p class="ql-block"><b>乳腺癌</b></p><p class="ql-block">在一個有關黑樹莓對乳腺腫瘤作用的飲食管理活動報告中發(fā)現(xiàn)，與喂食標準飲食的大鼠相比，喂食了黑樹莓或鞣花酸的大鼠中的腫瘤體積和多樣性都減小了。這個報告中所用的大鼠屬于ACI品系，乳腺腫瘤是由雌激素誘導的。并且，黑樹莓提取物和鞣花酸在顯著減少腫瘤體積和多樣性方面具有類似的療效。此外，黑樹莓可以有效下調雌激素受體ERα的表達。在人體MCF-7乳腺癌細胞系的體外研究中，發(fā)現(xiàn)黑樹莓提取物有可能使癌細胞對輻射損傷更加敏感。出現(xiàn)這種結果的原因應該是對NFκB的抑制作用，NFκB是癌細胞的一種輻射防護劑。</p><p class="ql-block"><b>口腔癌</b></p><p class="ql-block">在正常的、惡化前的及惡化的人口腔細胞上對黑樹莓提取物的化學預防作用進行評估。黑樹莓乙醇提取物可抑制惡性腫瘤細胞及癌變前細胞的生長，且對正常細胞沒有影響。并且發(fā)現(xiàn)鞣花酸、阿魏酸和β-谷甾醇對這些細胞也有同樣的效果，唯一的區(qū)別就是鞣花酸會抑制正常細胞的生長。鞣花酸的這種抑制作用可歸因于其對細胞周期蛋白和細胞周期蛋白依賴性激酶（Cdk）的影響，Cdk是一種在信號通路中可調節(jié)細胞周期進程的蛋白。在另一項口腔鱗狀細胞癌（SCC）的研究中，發(fā)現(xiàn)黑樹莓乙醇提取物有抑制細胞增殖、誘導凋亡、抑制VEGF產生及NOS活性的作用。為研究黑樹莓抑制口腔腫瘤的作用，采用7,12-二甲基苯基蒽誘導的致癌作用模型在倉鼠頰囊進行了實驗。與對照組相比，喂食中有5％黑樹莓粉末的倉鼠頰囊的腫瘤數(shù)量顯著減少。</p><p class="ql-block"><b>食道癌</b></p><p class="ql-block">研究黑樹莓的作用大多采用N-亞硝基甲基芐胺（NMBA）誘導ESCC（食管鱗狀細胞癌）的大鼠模型。</p><p class="ql-block">在抗癌研究中，給實驗大鼠分別喂食5％和10％的凍干黑樹莓粉，發(fā)現(xiàn)凍干黑樹莓粉可顯著減少病灶形成、腫瘤發(fā)病率及多樣性，從而證明黑樹莓可以抑制癌癥的發(fā)生及發(fā)展。有趣的是，5％劑量的黑樹莓粉似乎比10％的更有效。其抑制病變的作用與在食管中減少NMBA誘導的前致癌物O6-甲基鳥嘌呤加合物中的影響有關，這說明黑樹莓可影響NMBA的代謝，從而防止DNA的損傷。</p><p class="ql-block">后啟動研究表明，黑樹莓除了可以減少NMBA處理的大鼠中腫瘤病灶、數(shù)量及大小，還可把一些食管癌和食道乳頭狀瘤中異常表達的基因調節(jié)在正常水平。如表2（見22頁）所示，與草莓的凍干提取物相比，黑樹莓抑制NMBA誘導的DNA加合物形成更有效，同時還可減少腫瘤的發(fā)生率和多樣性。從補充大鼠中獲得了抑制食管組織培養(yǎng)及微粒體NMBA的有效成分，并被鑒定為矢車菊素-3-O-蕓香糖苷、鞣花酸和矢車菊素-3-O-葡糖苷。</p><p class="ql-block">在另一項研究中，發(fā)現(xiàn)黑樹莓提取物包括富含花色苷部分和有機不溶部分（預估含有大量單寧）可抑制癌以及癌前病變中的細胞增殖、炎癥、血管生成，這表明了黑樹莓抑制不同類型的癌癥的作用機制是相似的。此外，研究還發(fā)現(xiàn)，含有凍干黑樹莓、黑樹莓的花色苷及原兒茶酸（主要花色苷代謝產物）的飲食均可同等有效地抑制NMBA誘導的食管腫瘤，然而在35周以后的實驗中發(fā)現(xiàn)，還是凍干黑樹莓粉的效果會略微更好一些。</p><p class="ql-block">對食管鱗狀細胞癌的腫瘤進展的分子機制研究顯示，飲食中加入5％黑樹莓粉末可下調食管癌癌前病變中COX-2、iNOS、PGE2和c-Jun（AP-1蛋白家族成員）的mRNA和蛋白質的表達水平。黑樹莓提取物也被證明具有抗血管生成特性，可顯著抑制食管癌癌前病變中VEGF的表達，還可減少微血管密度（MVD），這都與抑制COX-2和iNOS有關。</p><p class="ql-block">此外，黑樹莓粉還能通過降低促炎生物標志物COX-2、iNOS、p-NF-κB，<span style="color: rgb(22, 126, 251);">可溶性環(huán)氧化物水解酶</span>和細胞因子正五聚蛋白-3的活性抑制食管內皮炎癥，上述的生物標志物是由IL-1b和TNF-α介導的。</p><p class="ql-block"><b>結直腸癌</b></p><p class="ql-block">關于黑樹莓對COX-2表達而影響HT-29結腸癌細胞的報道并不少。在幾種漿果提取物對抗HT-29結腸癌細胞促進細胞凋亡活性的研究中，黑樹莓提取物是有顯著促凋亡活性作用的兩種漿果之一（另一種是草莓），且其誘導細胞的效果是未經處理對照組的3倍。其他有關HT-29細胞抗增殖的報道中顯示，雖然黑樹莓提取物抑制癌細胞增殖存在劑量依賴性，但其抑制增殖的效果與總酚及總花色苷含量并沒有相關性。為了進一步探討這個問題，采用了基于1H NMR多變量統(tǒng)計模型的代謝組學研究來鑒定天然黑樹莓提取物中具有抗增殖活性的成分。發(fā)現(xiàn)，具有抗增殖活性的主要成分是矢車菊素-3-O-木糖基蕓香糖苷和矢車菊素-3-O-蕓香糖苷。然而，該模型數(shù)據(jù)還指出，黑樹莓的抗增殖功效并非直接與花色苷含量相關。這和之前的研究報告一致，花色苷可對癌細胞起到最大的作用，然而總花色苷含量的提高或種類分布的改變可能都不會提高提取物的活性。黑樹莓中的非花色苷成分雖然只占了總酚含量非常小的比例，但對黑樹莓提取物的抗增殖活性也非常重要，這些成分包括水楊酸衍生物、槲皮素-3-葡萄糖苷、槲皮素-3-蕓香糖苷、對香豆酸、表兒茶素、甲基鞣花酸衍生物和檸檬酸衍生物。</p><p class="ql-block">此外，研究還發(fā)現(xiàn)黑樹莓中的花色苷能抑制DNA甲基轉移酶的活性及表達，DNA甲基轉移酶對一些人體特定腫瘤包括HTC-116中的DNMT1、DNMT3B以及結腸直腸腺癌細胞系中的Caco-2、SW480的異常甲基化具有重要意義。這些結果表明黑樹莓中的花色苷對全黑樹莓在結直腸癌中的去甲基化作用是極具意義的。</p><p class="ql-block">潰瘍性結腸炎是一種可顯著增加結直腸癌風險的慢性潰瘍性結腸炎（UC），科學家們采用3％葡聚糖硫酸鈉（DSS）誘發(fā)潰瘍性結腸炎（UC）的小鼠模型評價凍干黑樹莓的化學預防效果。研究發(fā)現(xiàn)，飲食中豐富的黑樹莓粉末可顯著減少DSS引起的損傷包括結腸縮短及潰瘍，然而，這并沒有影響到氧化應激生物標志物（血漿NO和結腸丙二醛）的水平以及和結腸DSS損傷有關的炎性細胞浸潤。另一方面，7天的黑樹莓粉治療可抑制結腸組織中TNF-α、IL-1b、COX-2及IκB-α的磷酸化（IκB-α磷酸化后隨即降解，隨之而來的就是NFκB核因子的激活）。</p><p class="ql-block">還有一些其他的大腸癌動物模型運用于評價黑樹莓在體內的功效?；瘜W致癌物氧化偶氮甲烷（AOM）能夠誘發(fā)大鼠結直腸癌的發(fā)生，該動物模型被廣泛用于一些化學預防劑預防結腸癌的作用評價。喂食含有2.5％、5％、10％的凍干黑樹莓粉末的大鼠腫瘤多樣性分別降低42％、45％和71％，同時可顯著減少暴露于AOM的大鼠的DNA氧化損傷，降低尿中的DNA氧化損傷生物標志物8-OH-Dg的表達。</p><p class="ql-block">兩種基因缺陷小鼠模型APC1638+/-及Muc-/-，可分別自發(fā)發(fā)展成結直腸癌及結腸炎，可用于評價黑樹莓對結腸癌發(fā)展的影響及其潛在機制。在兩種模型中，喂飼黑樹莓12個星期可顯著抑制結直腸腫瘤的發(fā)生。APC1638+/-小鼠腫瘤發(fā)生率減少45%，單只腫瘤數(shù)量減少60%；Muc-/-小鼠的發(fā)生率和單只腫瘤數(shù)量則都是減少50%。機理研究結果表明，黑樹莓可通過抑制β-catenin信號通路（其過度表達與多種類型的癌癥相關）抑制APC1638+/-小鼠腫瘤發(fā)展，抑制Muc-/-小鼠腫瘤發(fā)展則是通過減少慢性炎癥。</p><p class="ql-block"><b>總結</b></p><p class="ql-block">黑樹莓具有獨特的多酚成分，主要由花色苷和鞣花單寧組成。黑樹莓的果肉具有很高的抗氧化性，且發(fā)現(xiàn)其在分子水平上可減少與癌癥和炎癥相關的過程。</p><p class="ql-block">黑樹莓通過影響致癌物質代謝、降低癌前細胞的生長速度、促進細胞凋亡、減少組織炎癥和抑制血管生成等機制對多種類型腫瘤均有一定的抑制作用。動物和體外研究的結果使得黑樹莓成為腫瘤早期化學預防的一種有前景的物質。</p><p class="ql-block"><br></p>